色谱柱是色谱体系的“心脏”。本文试着从液相色谱柱的填料和载体、相关理论公式、色谱柱的挑选和分类等方面体系解读液相色谱柱，让读者关于液相色谱柱有一个较为全面的了解。

  液相色谱技能是现在最有用和运用最广泛的运用剖析技能。其开展前史概略如下：

  至此，液相色谱理论和有关技能开端起步和开展。色谱柱是液相色谱开展的要害特点，是色谱体系的心脏。1941年，Martin报道说：“最有用的色谱柱应该经过较小粒径、较小的填料以及运用色谱柱内部存在压力差来取得”。

  经过近六十年的理论和技能的开展，今日简直现已不太可能会呈现那种没办法找到柱子来处理一个特定的HPLC别离试验的问题。

  色谱柱内部的填充包含有固相载体和一个附着的固定相。固相载体常见的资料是二氧化硅，其它较少运用的有聚合物：聚苯二烯-二乙烯基苯或聚甲基丙烯酸脂；还有氧化锆、二氧化钛或氧化铝，石墨化碳等。

  关于二氧化硅载体，常用的颗粒类型是彻底多孔的硅胶颗粒，其次是外表多孔颗粒，薄壳型颗粒，和灌注颗粒。前两者大多数都用在小分子的别离与制备，后两者常用于大分子的别离与制备。硅胶颗粒的粒径巨细一般在1.5μm-5.0μm规模。孔径巨细为7nm-12nm用于小分子别离，15-100nm用于大分子别离。

  硅胶全体柱是另一种载体，不同于上面的颗粒。它是由一个内部衔接的多孔床组成，是以一块多孔的硅胶为根底制备得到的。孔的直径一般有2μm 和10nm两种。

  色谱柱的挑选性与固定固的特点和衔接方法有密切关系。载体和键合相之间的衔接方法有多种，第一种是硅烷-硅烷键合技能有单键、双键、三键和双齿键合四种技能，运用多键键合可进步固定相在低pH条件下的安稳性；第二种是硅胶封端技能，能大大的进步填料在碱性条件下的安稳性，改进极性化合物和碱性化合物的峰形；第三种是在硅胶外表引进甲基、异丙基或异丁基等烷基，起空间位阻维护效果，防止在低pH条件下O-Si键的开裂；第四种是嵌入极性基团，进步固定相的亲水性和挑选性；第五种是引进带电填料颗粒，在色谱柱上完成多种别离机理。

  溶质分子在色谱柱上的保存是由溶质分子、固定相和活动相之间的相互效果决议的。它们之间的相互效果包含：①疏水性效果；②固定相对较大分子的空间排阻效果；③固定相与溶质分子间的氢键效果；④固定相与溶质离子间的静电相互效果；⑤偶极溶质分子与固定相间的偶极效果；⑥芳香溶质分子苯基柱，或许腈基柱间的π-π效果；⑦螯合的溶质分子与固定相外表的金属污染物构成复合物。

  色谱柱的条件包含色谱柱的长度、直径、填充颗粒的巨细和活动相的速率，这些条件决议了色谱柱的理论塔板数、别离时刻和柱子压力。与色谱相相关的公式有三个。

  为溶质的保存时刻，W是溶质峰在基线处的峰宽。保存时刻越长，N越大；反之，峰宽越大，N越小。N的巨细取决于柱填料性质、柱内径、柱长度和溶质分子的性质等。

  第二个公式是Van Deemter方程:H=A+Blu+Cu，H为总色谱峰谱带展宽，A为纵向（柱外）扩展要素引起的谱加宽；Blu为涡流涣散要素引起的谱加宽，由填充颗粒的摆放方法决议；Cu为固定相的溶质搬运要素引起的谱加宽；关于已知的溶质和色谱柱，A、B和C是固定的常数。由第一个公式能看出，溶质分子谱带展宽会影响色谱柱的N，因此在坚持tR必定的条件下，怎么削减溶质分子的谱带加宽，是进步色谱柱柱效要考虑的首要要素。

  Rs代表峰与峰之间的别离度；代表两个色谱峰的保存时刻之差；代表两个色谱峰在基线处峰宽的之差。色谱峰间的保存时刻差越大，别离度越大；峰宽之差越小，别离度越大。该公式与第一个公式的注释相似，用保存时刻和峰宽进行核算，取决于柱填料性质、柱内径、柱长度和溶质分子的性质等。

  液相色谱柱的分类在USP中现已更新到了L120，每类色谱柱首要包含色谱的填料和键合相品种，以及填料的直径或许孔径等信息。必需要分外留意的是，在USP中每类色谱柱的描绘下面会有厂家品牌的详细色谱柱清单，但该清单不作为USP引荐，仅用于剖析工作者的参阅。

  无论是在附录、更新版的USP-NF中，仍是在修订公告或暂时修订公告中，只有当提及色谱柱的文本成为正式文本时，新柱子的称号才会收到一个编号。在药典论坛的提案期间，新的色谱柱将在数据库顶用“L”、“G”或“S”标识，后边是专著标题和括号中的柱品牌称号。在提案期间，不会为其指定编号。

  L1：十八烷基硅烷化学键合到多孔二氧化硅微粒上，直径1.5至10μm，或为全体柱。

  L2：十八烷基硅烷化学键合到硅胶上，外表孔隙直径为30至50μm的实心球芯。

  L6：强阳离子交流填料，在直径30至50μm的实心球形芯上涂有磺化氟碳聚合物。

  L7：八烷基硅烷化学键合到直径为1.5至10μm的彻底多孔或外表多孔的二氧化硅颗粒，或为全体柱。

  L8：氨基丙基硅烷化学键合到1.5至10μm的彻底多孔硅胶载体，或为全体柱。

  L9：不规则或球形的彻底多孔硅胶，具有化学键合、强酸性阳离子交流涂层，直径为3～10μm。

  L11：苯基化学键合到1.5到10μm直径的多孔二氧化硅颗粒，或为全体柱。

  L12：一种强阴离子交流填料，经过季胺类化学键合到直径为30至50μm二氧化硅实球形芯上。

  L14：具有化学键合强碱性季铵阴离子交流涂层的硅胶，直径为5～10μm。

  L17：由磺化交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物组成的强阳离子交流树脂，氢型，直径6-12μm。

  L19：强阳离子交流树脂，由磺化交联的苯乙烯-二乙烯苯共聚物组成，钙型，直径5-15 μm。

  L20：二氢丙烷基与多孔二氧化硅颗粒化学键合，直径1.5到1μm，或为全体柱。

  L22：阳离子交流树脂为多孔聚苯乙烯凝胶，含磺酸基，直径为5～15μm。

  L23：一种阴离子交流树脂，由多孔聚甲基丙烯酸酯或聚丙烯酸酯凝胶制成，具有7～12μm的季铵基团。

  L25：用于中性、阴离子和阳离子水溶性聚合物的填料，其分子量在100-5000之间（由聚氧化乙烯测定）。依据成果得出，用聚羟基醚（外表含有一些剩余羧基官能团）交联的聚甲基丙烯酸酯树脂基是适宜的。

  L26：丁基硅烷化学键合到彻底多孔或外表多孔的二氧化硅颗粒上，直径1.5至10 μm。

  L28：一种多功用载体，由高纯度100埃、与阴离子交流剂结合的球形二氧化硅基质，由惯例胺基以及C8基团组成。

  L29：由g-氧化铝、反相低碳分量百分比,氧化铝聚丁二烯球形颗粒组成,直径5μm 和80埃的孔隙体积。

  L31：一种氢氧化物挑选性强阴离子交流树脂季胺类树脂，结合在乳胶粒子上，该乳胶粒子附着在8.5μm大孔粒子的芯上，该大孔粒子的孔径为2000埃，由与55%二乙烯苯交联的乙烯基苯组成。

  L32：一种手性配体交流树脂，L-脯氨酸铜络合物共价键合到直径为5-10μm的不规则形状的二氧化硅颗粒上。

  L34：强阳离子交流树脂，由磺化交联的苯乙烯-二乙烯苯共聚物（铅型）组成，直径7-9μm。

  L35：一种锆安稳球形二氧化硅填料，其具有孔径为150埃的亲水（二醇型）分子单层键合相。

  L36：一种L-苯基甘氨酸的3，5-二硝基苯甲酰衍生物，共价键合到5-μm氨基丙基二氧化硅上。

  L37：可以在2000-40000道尔顿规模内按分子巨细别离蛋白质，它是一种聚甲基丙烯酸酯凝胶。

  L40：纤维素Tris-3,5-二甲基苯氨基甲酸酯涂层多孔二氧化硅颗粒，直径3-20 μm。

  L42：辛基硅烷和十八烷基硅烷基，以化学方法键合至直径为5μm之多孔硅胶上。

  L43：五氟苯基经过直径为1.5至10μm的丙基片段与二氧化硅颗粒化学结合。

  L44：一种多功用载体，由高纯度、60埃、与阳离子交流剂结合的球形二氧化硅基质、有磺酸功用基及惯例反相C8功用组成。

  L45：β-环糊精，R,S-羟丙基醚衍生物，与多孔二氧化硅颗粒结合，直径3-10 μm。

  L46：聚苯乙烯/二乙烯基苯基底，与季胺类功用化乳胶珠结合，直径约9μm至11μm。

  L48：磺化交联聚苯乙烯，外层为亚微米、多孔、阴离子交流微球，直径5-15μm。

  L49：一种反相填料，经过在直径为3至10μm的球形多孔氧化锆颗粒上涂上一薄层聚丁二烯制成。

  L50：具有反相坚持和强阴离子交流功用的多功用树脂。树脂由乙烯基苯组成，55%与二乙烯基苯共聚物交联，直径3-15 μm，外表积不小于350 m2/g。基体涂有季铵功用化乳胶粒子，由苯乙烯与二乙烯基苯交联而成。

  L51：直链淀粉 tris-3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯涂层，多孔球形二氧化硅颗粒，直径3-10 μm。

  L52：一种强阳离子交流树脂，由具有磺丙基或磺甲基的多孔二氧化硅制成，直径1到10 μm。

  L53：弱阳离子交流树脂，由乙烯基苯组成，55%与二乙烯基苯共聚物交联，直径3~15μm。基质外表接枝羧酸和/或磷酸官能化单体。容量不小于500μEq/柱。

  L54：一种尺度排阻介质，由葡聚糖与高度交联的多孔琼脂糖珠共价键合而成，直径5-15 μm。

  L55：一种强阳离子交流树脂，由涂有聚丁二烯-马来酸共聚物的多孔二氧化硅制成，直径约5μm。

  L56：丙基硅烷化学方法结合至直径为3至10 μm的彻底或外表多孔硅胶上。

  L57：一种手性辨认蛋白、卵球形粘液化学结合到二氧化硅颗粒上，直径约5μm，孔径为120埃。

  L58：强阳离子交流树脂，由磺化交联的苯乙烯-二乙烯苯共聚物构成，呈钠型，直径约6-30μm。

  L59：可以在5-7000 kDa规模内以分子量别离蛋白质，填料为球形1.5-10μm二氧化硅或具有亲水涂层的混合填料。

  L60：球形多孔硅胶，直径为10μm或更小，其外表已与烷基酰胺基团共价改性并封端。

  L61：一种氢氧化物挑选性强阴离子交流树脂，由孔径小于10埃的13 μm微孔颗粒的高度交联芯组成，由与55%二乙烯苯交联的乙烯基苯组成，乳胶涂层由直径为85纳米的微生物组成。与烷醇季铵离子（6%）键合的EADS。

  L64：强碱性阴离子交流树脂，由8%交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物和季铵基氯构成，直径45-180 μm。

  L65：强酸性阳离子交流树脂，由2%磺化交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物和一个氢型磺酸基组成，直径63-250μm。

  L66：在5μm粒径硅胶基底上涂覆冠醚，活性部位为（S）-18-冠-6-醚。

  L67：带有C18烷基的多孔乙烯醇共聚物，衔接到聚合物的羟基上，直径2到10μm。

  L68：球形多孔二氧化硅，直径10μm或更小，其外表经烷基酰胺基共价润饰和未封端。

  L69：乙烯基苯/二乙烯基苯基质与季胺类功用化130纳米乳胶珠聚合，直径约6.5 μm。

  L72：（S）-苯甘氨酸和3,5-二硝基萘-尿素键共价键合到二氧化硅上。

  L74：一种强阴离子交流树脂，由具有100埃均匀孔径的7 μm大孔颗粒的高度交联芯组成，由与55%二乙烯苯交联的乙烯基苯和接枝到外表的阴离子交流层组成，其功用化基团为烷基季铵离子。

  L75：一种手性辨认蛋白，牛血清白蛋白（BSA）化学键合于二氧化硅颗粒，直径约为7μm，孔径为300埃。

  L76：硅基弱阳离子交流资料，直径5μm。底物是外表聚合的聚丁二烯马来酸，以供给羧酸功用。容量不小于29μeq/柱。

  L77：弱阳离子交流树脂，由乙烯基苯组成，55%与二乙烯基苯共聚物交联，直径6-9μm。基质外表接羧酸官能团，容量不小于500μeq/柱（4 mm x 25 cm）。

  L78：一种硅烷配体，由反相（一个比C8长的烷基链）和阴离子交流（一级、二级、三级或四分之一氨基）官能团组成，这些官能团经过化学方法结合到多孔或非多孔的二氧化硅微粒上，直径为1.0到50μm，或为全体柱。

  L79：一种手性辨认蛋白，人血清白蛋白（HSA）化学键合在二氧化硅颗粒上，直径约5μm。

  L80：纤维素tris-（4-甲基苯甲酸酯）涂层，多孔球形二氧化硅颗粒，直径5-20μm。

  L81：一种氢氧化物挑选性强阴离子交流树脂，由9 μm多孔颗粒的高度交联芯组成，孔径为2000埃，由乙烯基苯与55%二乙烯基苯交联而成，乳胶涂层由70纳米直径的微球（6%）组成。交联）与烷醇季铵离子结合。

  L83：一种氢氧化物挑选性强阴离子交流树脂四分之一胺，结合在乳胶粒子上，该乳胶粒子附着在具有10埃孔径的10.5μm微孔粒子芯上，由与55%二乙烯苯交联的乙烯基苯组成。

  L84：弱阳离子交流树脂，由乙烯基苯组成，55%与二乙烯基苯共聚物交联，直径5μm。基质外表接枝羧酸官能团。容量不小于8400μeq/柱（5 mm x 25cm）。

  L85：一种硅烷配体，由反相（一个比C8长的烷基链）和弱阳离子交流（羧基）官能团组成，它们经过化学方法结合到直径为1.0到50 μm的多孔或非多孔颗粒上。

  L86：熔融的核粒子与高度极化的配体，具有多个羟基在硅胶外层，直径1.5至5μm。

  L87：十二烷基硅烷化学键合到多孔或外表多孔的二氧化硅颗粒上，1.5到10μm。

  L88：糖肽万古霉素经过多重共价键与100-200埃的球形二氧化硅相连。

  L89：用于中性和阴离子水溶性聚合物的填料，具有别离分子量在100-3000（由聚氧化乙烯测定）之间的化合物的才能。是一种聚甲基丙烯酸酯树脂基，与聚羟基醚交联（外表含有一些残留的阳离子官能团）。

  L90：直链淀粉tris-[（s）-α-甲基苄基氨基甲酸酯]包覆在直径为3-10μm的多孔球形二氧化硅颗粒上。

  L91：一种强阴离子交流树脂，由单涣散多孔聚苯乙烯/二乙烯基苯珠与季胺偶联而成,珠子尺度为3-10 μm。

  L92：一种强阴离子交流树脂，由具有100埃均匀孔径的5-9μm大孔颗粒的高度交联芯组成，由与55%二乙烯苯交联的乙烯基苯和接枝到外表的阴离子交流层组成，其功用化基团为烷醇季铵离子。

  L93：纤维素tris-（3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯）反相手性固定相涂覆在3或5μm μm硅胶颗粒上。

  L94：一种强阴离子交流树脂，由高度交联的15μm微孔颗粒组成，功用化后的极低交联乳胶（0.5%）供给烷醇季铵离子交流位点。

  L95：高极性烷基配体，由五个羟基组成，它们经过化学方法结合到彻底多孔或外表多孔的二氧化硅或全体二氧化硅上。

  L96：烷基链，反相键合的彻底或外表多孔二氧化硅，用于在运用高水性活动相时保存亲水性和其他极性化合物，包含100%水性、1.5 μm至10 μm。

  L97：弱阳离子交流树脂，由5.5 μm多孔颗粒的高度交联芯组成，孔径为2000埃，由乙烯基苯与55%二乙烯基苯交联而成。基质外表接羧酸官能团，容量不小于2400 ¼EQ/柱（4 mm x 25cm）。

  L98：弱阳离子交流树脂，由高度交联的8.0μm微孔颗粒组成，均匀孔径为10埃单位，由与55%二乙烯苯交联的乙烯基苯组成。基质外表接枝羧酸官能团。容量不小于46 μEq/柱（4 mm x 5cm）。

  L99：直链淀粉tris-（3,5）-二甲基苯基氨基甲酸酯），固定在多孔球形二氧化硅颗粒上，直径3-5 μm。

  L100：一种55%交联微孔疏水树脂芯（9μm微孔颗粒，孔径为10埃单位），由阴离子和阳离子交流乳胶双层组成。第一层为全磺化乳胶（140nm），第二层为全胺化乳胶（76nm）。

  L101：结合到多孔或非多孔二氧化硅或陶瓷微粒上的胆甾醇基，直径1.5至10_¼m，或全体二氧化硅。

  L102：萘普生，[S，S]whelk-O1）-1-（3,5-二硝基苯甲酰胺基）-1,2,3,4-四氢苯丙氨酸共价键合到多孔球形二氧化硅颗粒上，直径5至10 μm。

  L103：一种氢氧化物挑选性强阴离子交流树脂，由7.5 μm多孔颗粒的高度交联芯组成，孔径为2000埃，由乙烯基苯与55%二乙烯基苯经过静电键与超标化烷醇季铵盐交联而成，Y铵离子。

  L105：一种强阴离子交流树脂，由高度交联的9μm超级大孔（2000埃）粒子组成，用极低交联乳胶（0.2%）功用化，以供给烷基季铵离子方位。

  L106：弱阳离子交流树脂，由乙烯基苯组成，55%与二乙烯基苯共聚物交联，直径5-8.5μm，大孔颗粒，均匀孔径60-100埃。基质外表接羧酸和膦酸官能团，容量不低于2800 μm EQ/柱（4 mm x 25 cm）。

  L107：纤维素三-（4-甲基苯甲酸）涂层多孔球形颗粒，直径3至5μm，用于反相活动相。

  L108：一种手性辨认蛋白，纤维二乙醇酶（CBH），化学键合到二氧化硅颗粒上，直径约5μm。

  L110：一种强阴离子交流树脂，由高度交联的13μm微孔（小于10埃）颗粒组成，涂有极低交联乳胶（0.5%）以供给烷醇季铵离子交流位点。

  L112：一种氢氧化物挑选性强阴离子交流树脂，由8.5μm多孔颗粒的高度交联芯组成，孔径为2000埃，由乙烯基苯与55%二乙烯基苯交联而成，乳胶涂层由65纳米直径的微珠（5%）交联与烷醇季铵离子结合。

  L113：一种氢氧化物挑选性强阴离子交流树脂，由7.5μm多孔颗粒的高度交联芯组成，孔径为2000埃，由乙烯基苯与55%二乙烯基苯交联而成，乳胶涂层由65纳米直径的微珠（8%）组成。交联）与烷醇季铵离子结合。

  L114：磺基甜菜碱接枝聚组成直径为1.5至10μm的彻底或外表多孔二氧化硅或全体二氧化硅棒，具有紧密结合的具有1:1电荷平衡的两性离子基的包装。

  L115：乙烯基苯/二乙烯基苯基质（55%交联），与季胺类官能化275纳米乳胶微球（6%交联）聚会，直径约8.5 μm。

  L116：磺化乙烯基苯/二乙烯基苯基底，与亲水性季胺类官能化缩水甘油基衍生物甲基丙烯酸盐微珠聚会，直径约2至50μm。

  L117：在5μm粒径硅胶基底上涂覆冠醚。活性部位为（R）-18-冠-6-醚。

  L119：纤维素三-（3,5-二氯苯基氨基甲酸酯），固定在直径为3-5微米的多孔球形二氧化硅颗粒上。

  L120：一种氢氧化物挑选性强阴离子交流树脂，由高度交联的13 µm组成，微孔颗粒孔径小于10埃，由乙烯基苯与55%二乙烯基苯交联而成，乳胶涂层由65纳米直径的微球（8%交联）与烷醇四分之一铵离子结合而成。容量不小于10µEQ/柱（4 mm x 5 cm）。